PCR引物退火温度一般为( )。

  PCR引物退火温度一般为( )。
临床执业医师考试要点解析:
☆☆☆☆考点5:聚合酶链反应;
在有模板DNA、特别设计合成的DNA引物及合成DNA所需要的三磷酸脱氧核苷存在时,向DNA合成体系加入热稳定的Taq DNA聚合酶,反应体系经反复变性、退火及扩增循环自动地、往复多次地在两引物间进行特定DNA片段的酶促合成,使反应产物按指数增长,这就是聚合酶链反应(PCR)。PCR基本工作原理概括如下:反应体系中的一对引物分别与模板DNA两条链的3′端特定序列互补,并恰好使所选择的互补序列分别位于待合成DNA片段的两侧。将反应体系置于特殊装置(自动温度循环器,俗称PCR仪)中,加热至高温(一般为94℃、90s)使模板DNA变性,再退火(55℃、2min),使引物与模板互补成双链,再升温至72℃,此时Taq DNA聚合酶催化DNA的聚合反应(通常为3min或视情况而定)。以后再变性、退火、聚合,如此循环改变温度,使聚合反应重复进行。由于每次温度循环所产生的DNA均可作为下次循环合成DNA时的模板,故可使目的DNA片段在两引物间按指数扩增,经历25~30次温度循环后DNA可扩增至一百万倍以上。

  

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