乙型肝炎病毒的生物学性状。1.形态与结构
乙型肝炎病毒(HBV)属嗜肝DNA病毒科。完整的HBV颗粒首先由Dane在乙型肝炎病毒感染者的血清中发现,故称为Dane颗粒。Dane颗粒呈球形,直径为42nm,具有双层衣壳。病毒的外衣壳,相当于一般病毒的包膜,HBV的表面抗原(HBsAg)即镶嵌于包膜的脂质双层中,内部了为一电子密度较大的核心结构,呈20面体立体对称,直径约为27nm,其表面即为病毒的内衣壳,内衣壳蛋白也具有抗原性,为HBV的核心抗原(HbcAg)。其在酶或去垢剂作用后,暴露出具有不同抗原性的e抗原(HBeAg)。HbeAg在体内可被分泌而存在于血清中,而HbeAg则仅存在于感染的肝细胞核内,一般很少存在于血清循环中。HBV核心结构的内部,含有病毒的DNA和DNA多聚酶。DNA为不完全环状双股,其中有一段为单股,单股区的长短在各病毒体可不等,但均不超过全长基因的一半。病毒DNA的长股为负股。而较短的一股为正股,病毒体具有特殊的DNA多聚酶,既有能以RNA为模板转录DNA的逆转录酶功能,又有合成DNA的功能。
2.抗原组成
(1)表面抗原(HBsAg)
在患者血清中HbsAg可以三种不同的形式存在:
①小球形颗粒:直径约22nm,是最多见的形式,主要由HbsAg组成,一般很少有PreS1或PreS2抗原。
②管形颗粒:直径同小球形颗粒,长短不等,实际是一串聚合的小球型颗粒。
③Dane颗粒的表面,为外衣壳的成分。
HbsAg有四个基本亚型:adr,adw,ary,ayw,各亚型均有共同抗原决定簇a,此外还有二组互相排斥的亚型抗原决定簇(d/y和w/r)。HbsAg亚型的分布,有明显的地区差异并与种族有关。我国汉族以adr多见,少数民族多为ayw.
HbsAg大量存在于感染者血中,是检查受HBV感染的主要标志。具有抗原性,可引起机体产生特异性有保护性的抗-HBs抗体,是制备疫苗的最主要成分。
(2)核心抗原(HBcAg)
存在于Dane颗粒核心部位的表现,为内衣壳成分。因其外表为HbsAg所覆盖,故不易在血循环中检测到。HBcAg抗原性强,能刺激机体产生抗HBc抗体。HbcAg可在感染的肝细胞表面表达,是杀伤性T细胞识别并清除HBV感染细胞的靶抗原之一抗-HBcIgC在血清中持续时间较长而抗HBc-IgM则常提示HBV处于复制状态。
(3)e抗原(HBeAg)
是由PreC及C基因编码,整体转录及翻译后成为e抗原(如仅由C基因转录及翻译则为HBcAg)。为可溶性蛋白质,可自感染肝细胞游离存在于血清中,因HbeAg的消长与病毒体及DNA多聚酶的消长基本一致,故HbeAg可作为体内有HIV复制及血清具有强感染性的一个标志。HbeAg可刺激机体产生抗-Hbe抗体,此抗体对HBV感染有一定的保护作用。
3.动物模型与细胞培养
黑猩猩是对HBV最敏感的动物。HBV尚不能在细胞培养中分离及培养,目前采用的细胞培养系统是病毒DNA转染系统。
4.抵抗力HBV对外界的抵抗力较强,不被70%乙醇灭活。高压灭菌法或100℃加热10分钟等可灭活HBV。